DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTICUERPOS FEBRILES. ANTÍGENOS BACTERIANOS

OBJETIVO

Aprender a realizar la determinación semicuantitativa de Ac febriles por la demostración del título de Ac específicos, somáticos o flagelares en el suero del paciente.

FUNDAMENTO

Los Ag bacterianos son una técnica de aglutinación en porta y tubo para la detección y semicuantificación de Ac anti- Salmonella, Brucella y Proteus en suero humano. Los reactivos aglutinan en presencia del Ac homólogo correspondiente en las muestras ensayadas. Forma las bases del ensayo de Widal que establece que altos niveles de Ac O y H superiores a 1/100 en suero, es indicativo de infección por estos microorganismos.

MATERIAL

• Gradilla
• Tubos de ensayo
• Micropipeta y puntas
• Estufa a 37ºC

REACTIVOS

• Proteus
• Control + 
• Control -

PROCEDIMIENTO

Realizamos directamente el método semicuantitativo.

1. Rotulamos los tubos con la dilución que llevarán.
2. Con una micropipeta dispensamos en los 6 tubos 1 mL de solución salina y luego 0,9 mL de solución salina solo en el primero. 
3. Añadimos 100 µL de muestra en el primero y realizamos una batería de dilución con 1 mL de volumen de paso desechando el ultimo volumen de paso. 
4. Echamos una gota de Ag a cada tubo y le damos un ligero toque para homogeneizar.
5. Luego lo tapamos con tapones y lo introducimos en la estufa donde lo dejamos 24 horas.

Al día siguiente observamos los resultados de los tubos y vimos que todos los compañeros que habíamos hecho Proteus no teníamos aglutinación en ningún tubo por lo que pensamos que estaba en mal estado.