DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTI-ESTREPTOLISINA O

OBJETIVO

Aprender a hacer una determinación cualitativa de la Proteína C-Reactiva mediante técnicas de aglutinación en porta.

FUNDAMENTO

El ASO-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de anti-estreptolisina O en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con estreptolisina O son aglutinadas por anticuerpos ASO presentes en la muestra del paciente.

MATERIAL

• Micropipetas y puntas
• Vaso para desechos
• Porta
• SSF

REACTIVOS

• Látex: suspensión de partículas de látex recubiertas con SLO.
• Control + (tapón rojo): suero humano con una concentración de FR > 30 Ul/mL.
• Control - (tapón azul): suero animal.

MUESTRA

Al no disponer de suero usamos el control + como muestra.

PROCEDIMIENTO

Método cualitativo

1. Depositamos 50 µL de control positivo y otros 50 µL de control negativo sobre un círculo distinto. 
2. Agitamos el reactivo de PCR- Látex y se deposita una gota sobre los controles. 
3. Mezclamos ambas gotas con una punta realizando círculos hacia el exterior ocupando toda la superficie del círculo. 
4. Tras ello agitamos la tarjeta suavemente durante dos minutos.

Método semicuantitativo

1. Realizamos diluciones dobles de la muestra en SSF. Para ello, añadimos 50 μL de solución salina fisiológica en cada círculo.
2. Añadimos 50 μL de muestra en el primer círculo.
3. Homogeneizamos y pasamos 50 μL al segundo círculo. Repetimos este paso hasta el último círculo que desechamos los 50 μL.
4. Añadimos una gota de látex y mezclamos con una punta de pipeta para cada círculo.
5. Agitamos durante 2 minutos y procedemos a la lectura.

Obtuvimos un resultado negativo y pensamos que se puede deber a que dejamos la tarjeta más tiempo del debido hasta hacer la lectura.