DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE FACTORES REUMATOIDES

OBJETIVO

Aprender a hacer una determinación cualitativa del factor reumatoide mediante técnicas de aglutinación en porta.

FUNDAMENTO

El FR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de factores reumatoides en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores reumatoides presentes en la muestra del paciente.

SIGNIFICADO CLÍNICO

Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de la inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, su principal interés clínico radica en el diagnostico de la artritis reumatoide.

MATERIAL

  • Micropipetas y puntas
  • Vaso para desechos
  • Porta
  • SSF

REACTIVOS

  • Látex: suspensión de partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana.
  • Control + (tapón rojo): suero humano con una concentración de FR > 30 Ul/mL.
  • Control - (tapón azul): suero animal.

MUESTRA

  • Suero
  

PROCEDIMIENTO

  1. Después de atemperar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente, un compañero de cada mesa realizó el control positivo y negativo.
  2. Para realizar los controles, depositamos una gota de cada uno de los controles en círculos distintos de un porta. 
  3. Movemos bien el reactivo látex y añadimos una gota a cada control.
  4. Mezclamos y extendemos por todo el círculo con ayuda de una punta de pipeta.
  5. Agitamos el porta durante dos minutos y observamos el resultado positivo y el negativo en los respectivos controles.
Método cualitativo
  1. Depositamos 50 μL de muestra en la tarjeta.
  2. Añadimos una gota de látex y movemos con una punta de pipeta.
  3. Agitamos durante dos minutos.
El resultado fue negativo porque el suero estaba caducado.

Método semicuantitativo
  1. Realizamos diluciones dobles de la muestra en SSF. Para ello, añadimos 50 μL de solución salina fisiológica en cada círculo.
  2. Añadimos 50 μL de muestra en el primer círculo.
  3. Homogeneizamos y pasamos 50 μL al segundo círculo. Repetimos este paso hasta el último círculo que desechamos los 50 μL.
  4. Añadimos una gota de látex en cada círculo y mezclamos con una punta.
  5. Agitamos durante 2 minutos y realizamos la lectura.
De nuevo el resultado fue negativo ya que el suero que usamos fue el mismo.
  

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