DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE FACTORES REUMATOIDES. WAALER ROSE.

OBJETIVO

Aprender a hacer una determinación cualitativa del factor reumatoide mediante técnicas de aglutinación en porta.

FUNDAMENTO

El Waaler Rose es una técnica de hemaglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de FR en suero humano. Los hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti-hematíe de oveja, son aglutinados por FR presentes en la muestra del paciente.

SIGNIFICADO CLÍNICO

Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de la inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, su principal interés clínico radica en el diagnostico de la artritis reumatoide.

MATERIAL
  • Porta
  • Micropipetas y puntas
  • Vaso de desecho
  • SSF

REACTIVOS

  • Waaler Rose: suspensión de hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti hematíes de oveja.
  • Control + (tapón rojo): suero humano con una concentración de FR > 30 Ul/mL.
  • Control - (tapón azul): suero animal.

MUESTRA

  • Suero

PROCEDIMIENTO

Para esta práctica un compañero de cada mesa realizó solo el control + y los demás realizamos el método semicuantitativo.

 Método cualitativo- control

  1. Colocamos una gota del control + en uno de los círculos de la tarjeta.
  2. Agitamos el Waaler Rose y añadimos una gota en el mismo círculo.
  3. Mezclamos con una punta.
  4. Colocamos la tarjeta sobre una superficie plana durante 2 minutos.
  5. Inclinar 45º durante 1 minuto.
Método semicuantitativo
Hidratamos el suero del paciente con 1 mL de agua y lo repartimos en eppendorff para todos los grupos.

  1. Realizamos diluciones dobles de la muestra en SSF. Para ello, añadimos 50 μL de solución salina fisiológica en cada círculo.
  2. Añadimos 50 μL de muestra en el primer círculo.
  3. Homogeneizamos y pasamos 50 μL al segundo círculo. Repetimos este paso hasta el último círculo que desechamos los 50 μL.
  4. Añadimos una gota de Waaler Rose y mezclamos con una punta de pipeta para cada círculo.
  5. Colocamos la tarjeta sobre una superficie plana durante 2 minutos.
  6. Inclinar 45º durante 1 minuto.
Pudimos observar en el método semicuantitativo que el resultado era negativo, por lo que no había aglutinación en ninguno de los círculos y por lo tanto no hay título ni concentración que obtener.


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