DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE PROTEÍNA C-REACTIVA

OBJETIVO

Aprender a hacer una determinación cualitativa de la Proteína C-Reactiva mediante técnicas de aglutinación en porta.

FUNDAMENTO

La PCR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de PCR en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR humana son aglutinadas por moléculas de PCR presentes en la muestra del paciente.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La Proteína C-Reactiva es una proteína de fase aguda, presente en el suero de pacientes sanos, la cual puede incrementarse significativamente en la mayoría de procesos infecciosos bacterianos y virales, tejidos dañados, inflamación y neoplasias malignas.

MATERIAL

• Micropipetas y puntas
• Vaso para desechos
• Porta

REACTIVOS

• Látex: suspensión de partículas de látex recubiertas con IgG de cabra anti-PCR humana.
• Control + (tapón rojo): suero humano con una concentración de FR > 30 Ul/mL.
• Control - (tapón azul): suero animal.

MUESTRA

• Suero

PROCEDIMIENTO

Para esta práctica un compañero de cada mesa realizó solo el control + y los demás realizamos el método semicuantitativo.

Método cualitativo- control

1. Colocamos una gota del control + en uno de los círculos de la tarjeta.
2. Agitamos el látex y añadimos una gota en el mismo círculo.
3. Mezclamos con una punta.
4. Agitamos la tarjeta durante 2 minutos y observamos el resultado positivo.

Método semicuantitativo

1. Realizamos diluciones dobles de la muestra en SSF. Para ello, añadimos 50 μL de solución salina fisiológica en cada círculo.
2. Añadimos 50 μL de muestra en el primer círculo.
3. Homogeneizamos y pasamos 50 μL al segundo círculo. Repetimos este paso hasta el último círculo que desechamos los 50 μL.
4. Añadimos una gota de látex y mezclamos con una punta de pipeta para cada círculo.
5. Agitamos durante 2 minutos y procedemos a la lectura.

Observamos aglutinación hasta el segundo círculo, por lo que el título sería 4.