DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTICUERPOS ANTI-TREPONEMA PALLIDUM

OBJETIVO

Aprender a llevar a cabo la detección cualitativa y semicuantitativa indirecta en microplaca de Ac específicos anti-Treponema pallidum.

FUNDAMENTO

La sífilis es una enfermedad venérea provocada por la infección con T. pallidum. La transmisión de produce por contacto directo a través de una lesión productiva. Los Ac anti-Treponema aparecen a partir de la primera fase y pueden permanecer en un 85-90% de pacientes tratados a pesar de haber superado la enfermedad.

MATERIAL

• Micropipeta y puntas
• Placa de microtiter

REACTIVOS

• R1: Células Test (TC): Hematíes de ave estabilizados y sensibilizados con Ag de T.pallidum
• R2: Células Control (CC): Suspensión estabilizada de hematíes de ave
• R3: Diluyente: Tampón fosfato

MUESTRA

• Suero

PROCEDIMIENTO

Método cualitativo

1. En el primer pocillo de la primera fila colocamos 25 µL de muestra (que ya venía diluida al 1/20) y 75 µL de células test (R1) y homogeneizamos.
2. En el segundo pocillo de la primera fila ponemos 25 µL de muestra y 75 de células control (R2).

Método semicuantitativo

1. En la segunda fila depositamos 25 µL de R3 (diluyente) en 4 pocillos.
2. Añadimos 25 µL de muestra ya diluida al 1/20 en el primer pocillo.
3. Realizamos la batería de dilución hasta el cuarto pocillo y desechamos los 25 µL.
4. Añadimos a cada pocillo 50 µL de células control.
5. Homogeneizamos y dejamos reposar 1 hora tapado con parafilm.
6. Observamos los resultados

El título sería 40.